今天若米知识就给我们广大朋友来聊聊基因转化的方法,以下关于观点希望能帮助到您找到想要的答案。
根癌农杆菌Ti质粒介导的植物基因转化有哪些方法？
答含重组Ti质粒的根癌农杆菌的培养，选择合适的外植体，根癌农杆菌与外植体共培养，外植体脱毒及筛选培养，转化植株再生等步骤。目前已建立了多种根癌农杆菌Ti质粒介导的植物基因转化方法，主要包括：（1）叶盘转化法：叶盘转化法（leaf：dish：transformation）是Monsanto公司Morsch等人（1985）建立起来的一种转化方法，其操作步骤为：首先用打孔器从消毒叶片上取下直径为25mm圆形叶片，即叶盘。再将叶盘放入培养至对数生长期的根癌农杆菌液浸泡几秒钟，使根癌农杆菌侵染叶盘。然后用滤纸吸干叶盘上多余的菌液，将这种经侵染处理过的叶盘置于培养基上共培养23d，再转移到含有头孢霉素或羧苄青霉素抑菌剂的培养基中，除去根癌农杆菌。与此同时在该培养基中加入抗生素进行转化体的筛选，使转化细胞再生为植株。对这些再生植物进行分子检测就可确定它们是否整合有目的基因及其表达情况。叶盘转化法已在多种双子叶植物上得到成功的应用。实际上，其他的多种外植体，例如茎段、叶柄、胚轴、子叶愈伤组织、萌发的种子均可采用类似的方法进行转化。该方法的优点是适用性广且操作简单，是目前应用最多的方法之一。
（2）原生质体共培养转化法：原生质体共培养转化法是以原生质体作为受体细胞，将根癌农杆菌与原生质体作短暂的共培养，然后洗涤除去残留的根癌农杆菌后，置于含抗生素的选择培养基上筛选出转化细胞，进而再生成植株。与叶盘转化法相比，此法得到的转化体不含嵌合体，一次可以处理多个细胞，得到相对较多的转化体。应用此法进行基因转化时，其先决条件就是要建立起良好的原生质培养和再生植物技术体系。
（3）整株感染法：此法是模仿根癌农杆菌天然的感染过程，用根癌农杆菌直接感染植物而进行遗传转化的一种简单易行的方法。其做法是：人为地在植株上造成创伤，然后把含有重组质粒的根癌农杆菌接种在创伤面上，或把含有重组质粒的根癌农杆菌注射到植物体内，使根癌农杆菌在植物体内进行侵染，实现转化。为了获得较高的转化频率，一般多采用无菌种子的实生苗或试管苗。用去除了致瘤基因的根癌农杆菌进行整株感染后，受伤部位一般不会出现肿瘤。在筛选转化体时，可将感染部位的薄壁组织切下放入选择培养基上及诱发愈伤组织的培养基上进行筛选和愈伤组织诱导，最后将转化的愈伤组织转移至含合适植物激素的培养基上诱导再生植株。在拟南芥（emphasis：role=italicArabidopsis：thalianaemphasis）上，将根癌农杆菌涂于植株腋芽处或顶牙，可长出转化的新枝条，新的转化枝条开花结实后，也可以获得转基因种子；或者通过真空渗透或农杆菌浸泡拟南芥开花植株，等结实之后，利用筛选萌芽种子的方法，也可以得到转基因植株及种子。
植物的转基因有哪些方法？
答目前已发展了许多用于植物基因转化的方法，这些方法可分为三大类：一类是载体介导的转化方法，即将目的基因插入到农杆菌的质粒或病毒的DNA等载体分子上，随着载体DNA的转移而将目的基因导入到植物基因组中，农杆菌介导和病毒介导法就属于这种方法；
第二类为基因直接导入法，是指通过物理或化学的方法直接将外源目的基因导入植物的基因组中，物理方法包括基因枪转化法、电激转化法、超声波法、显微注射法和激光微束法等；化学方法有PEG介导转化方法和脂质体法等；
第三类为种质系统法，这包括花粉管通道法、生殖细胞侵染法、胚囊和子房注射法等。
植物转基因的过程
答1、介导转化法：将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染，实现外源基因向植物细胞的转根癌农杆菌和发根农杆菌中，细胞中其上有一段T-DNA，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株；
2、基因枪介导转化法：利用火药或高压气体加速，将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中，然后通过细胞和组织培养技术，再生出植株，选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比，基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制，而且其载体质粒的构建也相对简单，因此也是目前转基因研究中应用较为广泛的一种方法。
基因水平转移有那些方式？
答1、接合作用：当细菌与细菌相互接触时，质粒DNA就可从一个细菌转移到另一个细菌。
2、转化作用：由外源性DNA导入宿主细胞，并引起生物类型改变或使宿主细胞获得新的遗传表型的过程，称为转化作用。
3、转导作用：当病毒从被感染的细胞释放出来，再次感染另一细胞时，发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组称为转导作用。
4、转座（转位）：转座是指一个或一组基因从一个位置转到基因组的另一个位置。可分为插入序列转座和转座子转座。
5、基因重组：不同DNA分子间发生的共价连接称基因重组。有两种类型：位点特异的重组和同源重组。
扩展资料：
基因水平转移的形成因素：
1、由质粒或病毒等介导的水平基因转移质粒和病毒是在各生物间进行遗传物质传递的重要媒介。
2、基因的“直接”水平转移水平基因转移除了通过质粒和病毒为媒介以外，大量发现的是不需要媒介的“直接”转移。
3、基因组序列分析和水平基因转移随着基因工程的深入开展，人类及其它生物基因组测序工作相继完成，人们发现不同物种之间，甚至亲缘关系很远的生物之间基因组上有大量同源基因存在。
4、水平基因转移与进化由前可知，水平基因转移实际上已被引入了分子进化及宏观进化领域，被认为是推动进化的重要动力。
参考资料来源：
百度百科-基因水平转移
从上文，大家可以得知关于基因转化的方法的一些信息，相信看完本文的你，已经知道怎么做了，若米知识希望这篇文章对大家有帮助。
